又是一年科研高峰期，很多老師和同學們用上了碧芯生物的Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒，也咨詢了很多問題，在這里，我們把問題總結一下，統(tǒng)一回復大家

一檢測項目部分常見問題

1 Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒可以檢測哪些細胞因子？

2 如果只檢測幾種，能否用Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒？

可以，我們這個聯(lián)檢試劑是可以靈活組合的，可以根據(jù)檢測目的，自由選擇幾種細胞因子聯(lián)合檢測（前提是在我們所提供的細胞因子范圍內(nèi)進行選擇，見題1）。試劑盒也是根據(jù)需要檢測的細胞因子數(shù)量來定價的。

二 樣本制備部分常見問題

1 檢測需要提供樣本是什么，需要多少檢測樣本量？

樣本：細胞培養(yǎng)上清、血清

所需樣本量：血清（25-50 μL）；細胞上清（25-50 μL）

2 要使用Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒對流式細胞儀有什么要求？

流式細胞儀需要有PE，APC ,APC-CY7 3個熒光通道。

3 是不是每次實驗都要使用一瓶新的標準品？

標準品在配成溶液后不穩(wěn)定， 在配制成溶液的12小時后將不能再使用，在每次實驗前都要重新配置新的標準品溶液。Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒（50T）會配置1管標準品，Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒（100T）會配置2管標準品。此外，也有單獨的標準品可以購買。

4 需不需要振動混合捕獲微球？

在使用之前 捕獲微球必須充分的振動混合， 從微球混合液試管中分到，每一個實驗管之前， 直至在送到儀器進行上樣檢測之前 反應管都必須充分振動混合， 這是由于充分的振動能夠防止微球聚集成團， 若混合不足會導致在進行樣品分析時候出現(xiàn)檢測到很少或者沒有檢測到微球的情況 ，因此在使用流式細胞儀分析標準品或者樣品之前， 必須充分振蕩混合微球， 試驗管在放置到流式細胞儀上檢測前需要振蕩混合3-5秒鐘， 這樣在FL3通道里面能夠更好的分辨出帶有不同標志的微球。

三 上機檢測部分常見問題

為什么實驗結果樣品都顯示高度的陽性？

可能是因為樣品的濃度太高 請對您的樣品, 進行不同稀釋度的檢測， 如果所有樣品都顯示陽性或者高于標準品的最高濃度讀數(shù)， 這時候請對您的樣品進行進一步的稀釋 因為您的樣品的濃度已高于本系統(tǒng)的正常檢測范圍。

四 結果分析常見問題

1 Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒檢測結果是否可直接與ELISA的分析結果進行對比?

不可以，Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑盒是基于流式熒光法的，雖然流式熒光法檢測體系相對于ELISA分析具有良好的優(yōu)勢 能夠提供更高的敏感性和更大的濃度檢測范圍， 但是兩者得出的實驗數(shù)據(jù)不能夠直接比較。需對Beadstar-mPlex®多細胞聯(lián)檢試劑檢測到的數(shù)據(jù)通過和已有的ELISA數(shù)據(jù)進行校正，得到兩者的相關性結果。

2 標準品和/或樣本的平均熒光強度過低的原因是什么？

1) 反應溫度低 2) 反應時間短 3) 樣本過度稀釋4) 孵育過程中未避光

3 聯(lián)檢細胞因子的檢測線性范圍一致嗎

不一致，每一種細胞因子都有對應的檢測范圍（見說明書，試劑盒說明書上有詳細說明）。我們不建議研究者根據(jù)標準曲線外推低于標準曲線值的實驗報告數(shù)值。