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碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

更新時(shí)間:2024-04-18點(diǎn)擊次數(shù):1060

液相懸浮芯片的儀器依據(jù)光路不同,存在著兩大體系。一種基于普通流式細(xì)胞儀檢測(cè)(也稱CBA體系),分群光路為675/780 nm;一種基于Luminex100/200檢測(cè),分群光路為658/712 nm。因?yàn)榉秩汗饴凡煌瑢?duì)應(yīng)這兩種體系的熒光編碼微球是不能兼容的,即CBA體系的微球不能用采用Luminex體系的儀器讀取,而Luminex體系的微球用CBA體系的儀器分群時(shí)也不能很好區(qū)分。

    目前市面上的流式熒光編碼微球大多數(shù)是基于普通流式細(xì)胞儀開發(fā)的,碧芯生物也已推出可在普通流式細(xì)胞儀上使用的38重磁性熒光編碼微球(可根據(jù)要求定制更多重)。然而除了Luminex自己公司的微球(也包括BIO-RAD),市面上幾乎沒(méi)有適用于Luminex100/200的磁性熒光編碼微球。這主要Luminex公司每群圈出的微球區(qū)域熒光分布較窄,即使在兩個(gè)熒光通道的批間熒光CV高于5%都會(huì)出現(xiàn)較嚴(yán)重的偏離,在當(dāng)前Luminex如此苛刻的設(shè)置下,非Luminex廠家制備能在Luminex自身的機(jī)器上使用的磁性熒光編碼微球的難度甚至比Luminex公司自身生產(chǎn)微球還高,需要對(duì)編碼熒光精準(zhǔn)調(diào)控,所以迄今為止尚無(wú)任何Luminex公司以外的其他廠家能生產(chǎn)出直接可以在Luminex機(jī)器上使用的微球。

    碧芯生物基于多年來(lái)在熒光編碼中積累的成熟技術(shù),摸索了一套制備適應(yīng)于Luminex200的磁性熒光編碼微球的工藝。圖1為碧芯生物推出的24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球(其它編碼可定制)。這些微球的生產(chǎn)工藝已經(jīng)成熟,可以規(guī)模化生產(chǎn)。

碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

圖1 碧芯生物推出的24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

   碧芯生物的二代低吸附磁性微球的質(zhì)量穩(wěn)定,性能超越進(jìn)口Luminex微球。以下是我們從兩個(gè)方面比較性能的測(cè)試結(jié)果:

(1)非特異性吸附比較:我們用PE(藻紅蛋白)來(lái)模擬微球?qū)Φ鞍椎姆翘禺愋晕?。從結(jié)果中可以看出,碧芯生物的二代羧基磁性熒光編碼微球BS-6-10K-COOH- A2對(duì)PE的非特異性吸附低。

表1 碧芯生物普通羧基磁性熒光編碼微球與低吸附羧基磁性熒光編碼微球?qū)υ寮t蛋白(PE)吸附能力對(duì)比

碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

(2)在檢測(cè)項(xiàng)目中的表現(xiàn)偶聯(lián)抗體/抗原后用于項(xiàng)目檢測(cè)中熒光信號(hào)的強(qiáng)弱以及信噪比是衡量微球性能的最重要指標(biāo)。為了驗(yàn)證幾種微球在檢測(cè)項(xiàng)目中的表現(xiàn),我們將這上述這幾種微球都標(biāo)記好小鼠抗人VEGF抗體,并做人VEGF檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。檢測(cè)信號(hào)如表1所示。從這些檢測(cè)結(jié)果來(lái)看碧芯二代羧基磁性熒光編碼微球在檢測(cè)信號(hào)方面也優(yōu)于進(jìn)口的兩種微球,信號(hào)值為L(zhǎng)uminex和Bio-Rad微球的2倍多。圖2為4種微球做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線(五參數(shù)擬合)。

碧芯生物新品—24重可在Luminex200使用的二代羧基磁性熒光編碼微球

圖2 五參數(shù)擬合四種熒光編碼微球做出的檢測(cè)VEGF的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    碧芯生物的二代羧基磁性熒光微球不僅穩(wěn)定性好(包括熱穩(wěn)定性和編碼穩(wěn)定性),檢測(cè)性能*,在編碼種類上也得到了極大的豐富,可滿足各種類型儀器的需求


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